小鼠胚胎成纖維細胞（MEF）原代培養在生命科學研究中用途廣泛，主要包括以下幾個方向：

細胞保種與細胞庫建立

原代MEF可作為細胞保種體系，用于長期保存細胞株并在需要時復蘇，保證實驗材料的穩定性和可重復性。

胚胎干細胞（ES）/誘導多能干細胞（iPSC）飼養層

MEF能夠分泌多種維持多能性的生長因子，并提供細胞基質，常被用作ES或iPSC的飼養層，以維持其未分化狀態和自我更新能力。

基因功能與基因編輯研究

通過轉染、CRISPR/Cas9等技術，MEF可用于驗證基因敲除、過表達或突變的功能，幫助構建轉基因小鼠模型或解析信號通路。

分子生物學實驗平臺

由于MEF易于轉染且增殖快，常用于報告基因、熒光標記、蛋白相互作用、信號通路活性等分子實驗的檢測。

基因治療相關研究

MEF可作為病毒包裝細胞（如慢病毒、腺病毒）或基因遞送系統的生產平臺，為基因治療載體的制備提供原料。

藥物篩選與毒理學評估

通過在MEF上進行化合物處理或共培養模型（如免疫細胞、腫瘤細胞），可評估藥物的細胞毒性、代謝活性及作用機制。

細胞老化與衰老機制研究

原代MEF的有限增殖特性使其成為研究細胞衰老、復制極限及相關分子標記的理想模型。

共培養模型

將MEF與其他細胞類型（如神經元、心肌細胞）共培養，可模擬組織微環境，研究細胞間相互作用和信號傳遞。

其他應用

作為轉基因小鼠的飼養層細胞，支持胚胎移植和胚胎發育研究。

用于高通量篩選平臺，結合自動化培養系統進行大規模實驗。

綜上，MEF原代培養因其易獲取、增殖活躍、能夠提供天然細胞基質和分泌多種生長因子，已成為細胞生物學、干細胞學、基因工程、藥物研發等多個研究領域的基礎工具。